用灭菌镊子夹取滤膜移放在MFC培养基（6.1）上，滤膜截留细菌面向上，滤膜应与培 养基完全贴紧，两者间不得留有气泡，然后将培养皿倒置，放入恒温培养箱内，44.5℃土0.5℃ 培养24h±2h。

9. 3. 1空白对照

9.3.2阳性及阴性对照

安全生产标准要用无菌水（63）按照步骤9.1和9.2进行实验室

将粪大肠菌群的阳性菌株（如大肠埃希氏菌Escherichiacoli）和阴性菌株（如产气肠杆 菌Enterobacteraerogenes）制成浓度为40～600CFU/L的菌悬液，分别按照9.1～9.2步骤培养， 阳性菌株应呈现阳性反应，阴性菌株应呈现阴性反应，否则，该次样品测定结果无效，应查 明原因后重新测定。

MFC培养基上呈蓝色或蓝绿色的菌落为粪大肠菌群菌落，予以计数。 MFC培养基上呈灰色、淡黄色或无色的菌落为非粪大肠菌群菌落，不予计数。 结果判读参考图片见图1。

中的粪大肠菌群数（CFU/L），按照公式（1）进

阴性菌落（箭头指示处）

图1结果判读参考图片

式中：C一 一样品中粪大肠菌群数，CFU/L； CI一滤膜上生长的粪大肠菌群菌落总数，个： 1000一将过滤体积的单位由ml转换为L； f一样品接种量，ml； 注：若平行样结果都在20～60CFUL范围内，最终结果取平均值以几何平均计算。

测定结果保留至整数位，最多保留两位有效数字，当测定结果≥100CFU/L时，以科学 计数法表示。粪大肠菌群检验记录及报告格式参见附录A。

6个实验室对低浓度（地下水，浓度均值为2.0X102CFU/L）、中浓度（地表水，浓度 均值为1.6×105CFU/L）和高浓度（生活污水，浓度均值为1.6×107CFU/L）三个不同浓度 粪大肠菌群的实际样品和有证标准样品（浓度为3670MPN/L，可接受范围为330~ 7710MPN/L）进行了6次重复测定：实验室内相对标准偏差范围分别为5.3%～12%、0.81%~ 2.1%、0.51%~4.2%和7.7%~9.8%；实验室间相对标准偏差分别为6.8%、3.9%、4.0%和3.6%； 实验室间95%置信区间见表2。

表2实验室间95%置信区间

12质量保证和质量控制

更换不同批次培养基时要进行阳性和阴性菌株检验，将粪大肠菌群测定的阳性菌株（如 大肠埃希氏菌Escherichiacoli）和阴性菌株（如产气肠杆菌Enterobacteraerogenes）配成适 宜浓度，按样品过滤（9.1）的要求使滤膜上生长的菌落数为20～60个，然后按培养（9.2）

的要求进行操作，阳性菌株应生长为蓝色或蓝绿色菌落，阴性菌株应生长为灰色、淡黄色、 无色或无菌落生长。否则，该次样品测定结果无效，应查明原因后重新测定。

12.2. 1空白对照

每次试验都要用无菌水做实验室空白测定（93.1)，培养后的培养基上不得有任何菌落 生长。否则，该次样品测定结果无效，应查明原因后重新测定

12.2. 2阳性及阴性对照

定期按照93.2进行阳性及阴性对照试验，阳性菌株应呈现阳性反应，阴性菌株应呈现 阴性反应，否则，该次样品测定结果无效，应查明原因后重新测定。

使用后的废物及器皿须经121℃高压蒸汽灭菌30min或使用液体消毒剂（自制或市售） 灭菌后，器血方可清洗，废物作为一般废物处置。

当样品浑浊度较高时，应选用其他方法。

附录A （资料性附录） 粪大肠菌群检验记录及报告格式

固定资产标准表A.1粪大肠菌群测定检验记录

检验者：校对：审核：

注：可根据实际工作需要自行设计表格，至少要包括上述信息。

表A.2粪大肠菌群测定数据报告格式

注：可根据实际工作需要自行设计表格，至少要包括上述信息。

：可根据实际工作需要自行设计表格出口产品标准，至少要包括上述