5.6.1.1制备过程应在无菌条件下进行。 5.6.1.2培养条件应按照供应商提供的使用说明书要求进行。 5.6.1.3培养物应进行标识，标识内容应包括名称、菌种号、传代日期和代数及使用类型等信息 5.6.1.4应记录制备信息，制备记录表参见附录C中的表C.4。

5. 6. 2 制备过程

灌注桩标准规范范本5. 6. 2. 1复苏

5. 6. 2. 2平板分离

非选择性平板对复苏后的标准菌株进行分离、纯

5. 6. 2. 3确认

对平板分离出的菌落进行存活性、纯度确认。确认合格后，方可进行制备。如确认不合格，应及时 灭菌销毁。

5.6.2.4标准储备菌株制备

挑取纯菌落进行分装保藏，即得到标准储备菌株（第2代）。标准储备菌株制备流程按照附录D执行 标准储备菌株不应作为标准菌株使用

5.6.2.5储备菌株制备

取标准储备困体，在非选择性平上 菌株（第3代）。储备菌株制备流程按照附录E执行。储备菌株不应作为标准储备菌株或标准菌株使用。 一T蓝

5.6.2.6工作菌株制备

5.6.2.6.1由标准菌株制备工作菌株（第3代）

取标准菌株，在复苏、分离确认合格后，挑取纯菌落转接于斜面进行培养，即得到工作菌株（第3 代）。制备流程按照附录F图F.1执行。工作菌株不应作为储备菌株、标准储备菌株或标准菌株使用。

取标准储备菌株，在非选择性平板上转种培养并验证合格，挑取纯菌落转接于斜面进行培养，即得 到工作菌株（第4代）。制备流程按照附录F图F.2执行，

5.6.2.6.3由储备菌株制备工作菌株（第5代）

取储备菌株，在非选择性平板上转种培养并验证合格，挑取纯菌落转接于斜面进行培养，即得到工 作菌株（第5代）。制备流程按照附录F图F.3执行

5.6.2.6.4由工作菌株（第3代）制备工作菌株

由工作菌株（第3代）制备工作菌株（第4代）

取工作菌株（第3代），挑取纯菌落转接于斜面进行培养，即得到工作菌株（第4代）。制备流程按 照附录F图F.4热行。

.2.6.5由工作菌株（第4代）制备工作菌株（第

取工作菌株（第4代），挑取纯菌落转接于斜面进行培养，即得到工作菌株（第5代）。制备流程按 照附录F图F.5执行。

5.7.1销毁工作应由两人共同操作，并对销毁过程进行严格监督。

5.7.2将需要销毁的菌株和使用过的带菌耗材经121℃高压灭菌至少30min，再放入实验室生物废弃物 处理桶。需要销毁的菌株包括但不限于： 解冻使用后的标准储备菌株、储备菌株； b 经确认或验证不合格的菌株； C） 超过保存期限的菌株； d 其他应废弃的菌株。 5.7.3 废弃物应按GB19489中废物处置规定进行处理。 5.7.44 销毁记录表参见附录C中的表C.5。

附录A （资料性） 菌株的代数、使用类型、继承关系 各代菌株的代数、使用类型、继承关系见表A.1。

表A.1各代菌株的代数、使用类型、继承关系

附录B （规范性） 标准菌株管理流程

标准菌株管理流程见图B.1。

图B.1标准菌株管理流程图

C.1验收记录表见表C.1

附 录 （资料性） 记录表

表 C.1验收记录表

C.2保藏与领用记录表见表C.2

表C.2保藏与领用记录表

表C.2保藏与领用记录表

C.3期间核查记录表见表C.3。

C.3期间核查记录表见表C.3。

表C.3期间核查记录表

.4制备记录表见表C.4.

C.5销毁记录表见表C.5。

标准储备菌株制备流程见图D.1

附录D （规范性） 标准储备菌株制备流程

附录D （规范性） 标准储备菌株制备流程

图D.1标准储备菌株制备流程图

储备菌株制备流程见图E.1

附录E （规范性） 储备菌株制备流程

图E.1储备菌株制备流程图

F.1标准菌株制备工作菌株流程见图E.

附录F （规范性） 工作菌株制备流程

图F.1标准菌株制备工作菌株流程图

阻燃标准F.2标准储备菌株制备工作菌株流程见图F.2

图F.2标准储备菌株制备工作菌株流程图

F.3储备菌株制备工作菌株流程见图F.3。

图F.3储备菌株制备工作菌株流程图

F.4工作菌株（第3代）制备工作菌株（第4代）流程见图F.4

路桥管理及其他图F.4工作菌株（第3代）制备工作菌株（第4代）流程图

F.5工作菌株（第4代）制备工作菌株（第5代）流程见图F.5

5工作菌株（第4代）制备工作菌株（第5代）流程