DB11／T 1930-2021  放射工作人员健康检查染色体畸变和微核检测质量控制规范

4.5.1有染色体和微核标本片、原始记录、报告和档案的存放地点，有专门的电子存储设备用于存储 图片。 4.5.2 标本片存放期限为2年，原始记录和报告存放期限为6年，图片等电子文件存放15年。 4.5.3 职业健康检查档案保存时间应当自放射工作人员最后一次职业健康检查结束之日起不少于15 年。

5实验室及仪器设备要求

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5.1.1制片室面积宜大于20m，应配备排风装置、水平离心机、负压移液装置或真空吸液泵、水浴锅 等设备，宜选配细胞自动收获仪、自动制片机、自动染片机、自动接种仪等。 5.1.2细胞培养间应配置生物安全柜或超净工作台、恒温培养箱、冰箱等。 5.1.3显微阅片室应配置光学显微镜及摄像系统，宜选配全自动染色体扫描分析系统施工标准规范范本，

.2仪器设备及技术指标要求

仪器设备及技术指标符合表1要求！

表1仪器设备及技术指标要求

6染色体畸变检测质量控制

染色体畸变检测操作宜参照《放射工作人员职业健康检查外周血淋巴细胞染色体畸变检测与评 价》（GBZ/T248）的规定。应采用培养开始加秋水仙素的方法

6.2样本的采集、运输和保存

6.2.1血液采集应在所有放射性检查之前。

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6.2.2血液运输和保存的最佳温度为18℃～24℃。样本采集后应尽早接种，当日无法接种的样本保存 时间不宜超过72h。 6.2.3可接种到含植物凝集素培养基后于4℃～20℃保存。 6.2.4每份样本应有唯一编号，编码规则由各实验室制定。

6.3培养基的质量控制

6.4培养过程的质量控制

血液标本应在37℃培养箱中培养48h～52h，培养箱内应放置温度计进行温度监测。申老 样本宜接种多份平行样或适当延长培养时间，

6.5染色体制片质量控制

6.5.1合格中期细胞的选择

染色体数目为46土1；染色体分散良好，长短粗细适中，背景干净，各条染色体可清楚辨认。见

6.5.2出现以下情况的中期细胞不宜作计数分

a）染色体数目少于45或多于47条； b) 在同一细胞内染色体过于分散，不能在一个油镜视野内观察到； C 染色体形态过度细长或过度短粗： d) 染色体呈扭曲状或紧缩成团 e 染色体分散不良，重叠太多； f) 染色太深不能鉴别染色单体交叉重叠； 9) 同一条染色体的两条染色单体间距离过大。 5.3 染色体制片每样本能检出不少于200个合格中期分裂细胞。

6.6.1染色体畸变的表示符号应符合以下要求 a）畸变类型及表示符号应符合表2要求：

6.6.1染色体畸变的表示符号应符合以下要求：

图2双着丝粒体和无着丝粒断片

图3着丝粒环和无着丝粒断片

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b）若细胞中出现不同数目的双着丝粒体、着丝粒环、三着丝粒体以及无着丝粒体，表示符号应符 合表3要求。

色体畸变类型及表示符

表3细胞染色体畸变及表示方法

6.6.2拍摄及原始记录应符合以下要求

a）人工阅片的实验室需对畸变细胞拍照，并在原始记录和图片文件名中标明显微镜编号、样本编 号、畸变细胞坐标、畸变类型和数目； b） 有全自动染色体扫描分析系统的实验室需要在原始记录上记录显微镜编号、样本编号、畸变细 胞号、畸变类型和数目，对畸变细胞标注后保存，并需保存所有样本高倍申期细胞图片； C）一个细胞的所有染色体应在一张图片内，完整展现一个细胞的染色体全貌。 6.6.3 阅片的数量应符合以下要求： a） 对于人工阅片的实验室，每人每天分析1～4个样本为宜； b 具备全自动染色体扫描分析系统的实验室每天阅片数量不设限制； ） 在仪器使用记录上应记录每天阅片数量并签字。 6.6.4如全自动染色体扫描分析系统拍摄到双着丝粒体或者着丝粒环等畸变，应该将此分裂相再次放 到显微镜下并调整微调旋钮进行人工镜检，仔细辨认予以鉴定，并通过核型分析软件确认。如果使用双

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着丝粒自动扫描分析系统识别双看丝粒体，仍需经人工分析判定，不应仅通过软件识别。 6.6.5如果在分析100个中期分裂细胞中发现有双着丝粒体、着丝粒环、稳定性染色体畸变或3个及以 上无着丝粒体，宜另外追加分析100个细胞，并计算此200个细胞的染色体畸变率进行结果评价，或通知 受检者复查。 6.6.6染色体畸变应由两名以上技术人员复核确认。 6.6.7原始记录的格式宜参照《放射工作人员职业健康检查外周血淋巴细胞染色体畸变检测与评价》 (GBZ/T248） 5.6.8对本年度拍摄的体检染色体图片抽检，识别准确率应达到90%以上

6.7.1报告的格式宜参照《放射工作人员职业健康检查外周血淋巴细胞染色体畸变检测与评价》（GBZT 248）。 6.7.2检测结果异常者应附标注的畸变图像。 6.7.3报告采取分析人、复核人双人签字。 6.7.4应在体检结束之日起25个工作日内出具报告。

6.7.1报告的格式宜参照《放射工作人员职业健康检查外周血淋巴细胞染色体畸变检测与评价 248）。 6.7.2检测结果异常者应附标注的畸变图像。 6.7.3报告采取分析人、复核人双人签字。 6.7.4应在体检结束之日起25个工作日内出具报告。

6.7.1报告的格式宜参照《放射工作人员职业健康

应采用胞质分裂阻滞法（CB微核法）进行微核检测，操作规程宜参照WS/T187和附录A

7.2样本的采集、运输和保存、培养基的质量

7.2.1样本的采集、运输和保存应符合6.2.1和6.2.2的要求

7.2.1样本的采集、运输和保存应符合6.2.1和6.2.2的要求。 7.2.2培养基的质量控制应符合6.3的要求。

7.4微核制片质量控制

7.4.1双核淋巴细胞的判断应符合以下要求：

.4.1双核淋巴细胞的判断应符合以下要求： a) 双核淋巴细胞胞浆完整； b) 胞浆和胞核能明确区分； C) 一个双核淋巴细胞胞浆与邻近细胞的胞浆界限清楚； d 位于一个细胞质内、互相不连接的两个独立的核，如果有一个或多个核质桥连接，桥不宽于 主核的1/4; e） 两个核的大小接近，色度深浅相同； f）两个核不重叠，如果重叠必须能识别各自的边缘。 4.2 微核制片每样本能检出不少于1000个合格双核淋巴细胞，

7.5.1微核的判断标准：见示例图4、

?) 微核直径为主核直径的1/16到1/3； b) 微核呈圆形或椭圆形，结构与主核相同； C) 微核与主核不连接，如有重叠或相切，必须能看到各自的边缘； d 微核染色与主核一致或略浅； e) 微核不折光，与染料颗粒等人工产物相区别。

图4正常双核淋巴细胞

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图51个细胞含1个微

51 个细胞含1个微核 图61个细胞

图61个细胞含3个微核

7.5.2拍摄及原始记录应符合以下要求： a）人工阅片的实验室需对微核细胞拍照，并在原始记录上记录显微镜编号、样本编号、微核细胞 坐标； b） 使用微核自动扫描分析系统的实验室需要在原始记录上记录显微镜编号、样本编号、微核细胞 号，并需保存所有样本双核淋巴细胞图片。 7.5.3 阅片的数量应符合以下要求： a 对于人工阅片的实验室，每人每天分析不宜超过20个样本； b) 具备微核自动扫描分析系统的实验室每天阅片数量不设限制； C) 在仪器使用记录上应记录每天阅片数量并签字。 7.5.4 使用微核自动扫描分析系统的实验室需对双核淋巴细胞和微核图像人工分析判定，不应仅通过 软件识别。 7.5.5原始记录的格式宜参照附录B。

7.6.1报告的格式宜参照附录C。 7.6.2报告采取分析人、审核人双人签字。 7.6.3应在体检结束之日起25个工作日内出具报告。

7.6.1报告的格式宜参照附录C。

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附录A （资料性） 人外周血淋巴细胞微核检测规程

A.1.2低渗液氯化钾（KC1）的配制

称取氯化钾5.59g，加入去离子水使其充分溶解，定容到1000mL，配成0.075mo1/L氯化钾溶液 常温保存备用。

A.1.3固定液的配制

取甲醇、冰乙酸，配成体积比3:1的固定液。固定液需在用前新鲜配制

A.2.1外周静脉血采集

体检时静脉血的采集应在所有放射性检查前进行。用肝素抗凝采血管采集受检者静脉血约2mL。

A.2.2全血培养步骤

将培养后细胞于离心管以1000r/min～1500r/min（约200g～250g)离心8min～10min后，取出 离心管，用吸管轻轻吸去上清液，每管加入8mL经37℃预温的0.075moI/LKCl，将细胞团块轻轻吹打 混匀

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低渗完毕，立即每管加入1mL新配制的固定液，用吸管吹打混匀，以1000r/min～1500r/min(终 200g~250g)离心8min~10min。

A.3.3 第一次固定

取出离心管，用吸管吸去上清液，每管中加入8mL固定液，用吸管快速吹打细胞团块并充分吹打 混匀，常温下固定20min~30min，以1000r/min~1500r/min(约200~250g)离心8min~10min。

A.3.4 第二次固定

取出离心管，重复第一次固定的操作

取出离心管，吸去上清液，根据细胞团块的大小每离心管中留3滴～5滴固定液以调节细胞浓度 然后将细胞悬液滴到4℃冰箱预冷的洁净载玻片上，室温空气自然干燥

对每一张微核标本片进行编号，并按照编号做

在显微镜（400×）下阅片，根据7.4.1和7.5.1选择双核淋巴细胞和微核进行分析。对微核 照，并将坐标记到原始记录上。共分析1000个双核淋巴细胞，

计算微核率螺栓标准，按本实验室正常值范围进行评价

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人外周血淋巴细胞微核检测原始记录

（淋巴细胞微核检测原始记烹

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表B.1外周血淋巴细胞微核检测记录表

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安全网标准附录C （资料性） 人外周血淋巴细胞微核检测报告

人淋巴细胞微核检测报告