5.5.3预浓缩应考虑以下因素：

a） 选择预浓缩方法前，应对预浓缩方法对水样毒性检测结果的影响进行评估 b） 充分考虑预浓缩的选择性程度和浓缩系数，不可将预浓缩样品的急性毒性测试的效应推断为 原始样品的慢性影响； c 有机污染物组分宜采用液液萃取、固相萃取等方法； 蒸发、冷冻干燥和萃取应考虑挥发性物质的损失的影响； e） 蒸发和冷冻干燥应考虑离子强度和渗透压提高的影响； f) 超滤应考虑穿透膜的小分子的损失带来的影响； g) 应考虑预浓缩过程中某些化合物浓度超过其溶解度时产生的物质沉淀或絮凝的影响。 5.5.4试验报告中应详细记录样品的预浓缩方法及过程

几种常见的生物毒性检测方法的样品前处理示例参见附录A，分别为发光菌急性毒性检测试验 生物毒性检测试验、哺乳动物毒性检测试验和细胞毒性检测试验的样品采集后的实验室前处理过

7.1设置现场空白样本，作为样本对采样过程进行分析，以识别与取样容器污染和取样过程有关的误差。 7.2设置阳性对照，将生物毒性检测中会产生阳性结果的对照物加入空白样本中，作为样本对前处理 过程进行分析。 7.3设置平行样。 7.4当需要在现场或实验室过滤样品时，应使用与实验室样品相同的过滤程序处理现场空白和阳性对 照样品。

牛奶标准1发光菌急性毒性检测试验前处理

附录A （资料性附录） 样品前处理示例

本步骤处理后的样品适用于发光菌急性毒性检测试验，为减少样品中悬浮颗粒对发光菌 检测结果的干扰，样品需过滤处理后再进行稀释

A.1.2 试剂或材料

A.1.2.2玻璃纤维膜：5

过滤装置：带有真空泵的砂芯过滤装置

1.1.4.1样品过滤：采用玻璃纤维膜对待测样品进行过滤。

A.1.4.1样品过滤：采用玻璃纤维膜对待测样品进行过滤。 A.1.4.2样品稀释：根据试验需求，用水稀释样品配成不同浓度的试验溶液，在定容前按每100mL样 品加人3g氯化钠的浓度添加氯化钠

A.2水生生物毒性检测试验前处理

本步骤处理后的样品适用于多种水生生物毒性检测试验，包括：大型蚤、鱼类、大型甲壳类等水生生 的急性毒性、慢性毒性等毒性检测试验，为减少样品中悬浮颗粒对水生生物毒性检测结果的干扰，样 品需过滤处理后再进行稀释、温度及溶解氧的调节

A.2.2.1盐酸溶液：0.1mol/L。 1.2.2.2 氢氧化钠溶液：0.1mol/L。 A.2.2.3 氯化钙溶液：称取11.76g氯化钙（CaCl2·2H2O)溶于水，用水稀释至1L A.2.2.4 硫酸镁溶液：称取4.93g硫酸镁（MgSO，·7H,O)溶于水，用水稀释至1L A.2.2.5 碳酸氢钠溶液：称取2.59g碳酸氢钠（NaHCO：）溶于水，用水稀释至1L。 A.2.2.6 氯化钾溶液：称取0.23g氯化钾（KCI)溶于水，用水稀释至1L。 A.2.2.7 玻璃纤维膜：5um

4.2.3.2过滤装置：带有真空泵的砂芯过滤装置 A.2.3.3溶氧仪

GB/T39304—2020

A.2.4.1样品过滤：采用玻璃纤维膜对待测样品进行过滤。 A.2.4.2标准稀释水的制备：氯化钙溶液、硫酸镁溶液、碳酸氢钠溶液及氯化钾溶液分别移取25mL加 以混合，并用水稀释至1L，混匀后曝气，同时用溶氧仪测定，直至溶解氧浓度达到空气饱和值后，再用 氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节溶液pH值为7.0士0.2。 A.2.4.3样品稀释：根据试验需求，用标准稀释水（A.2.4.2）稀释样品配成不同浓度的试验溶液进行毒 性检测试验 A.2.4.4稀释后样品温度调节：根据受试生物的不同，维持待测样品温度在合适范围。 A.2.4.5稀释后样品溶解氧调节：使用曝 持待测样品溶解氧不低于空气饱和值的60%

A.2.4.1样品过滤：采用玻璃纤维膜对待测样品进行过滤。 A.2.4.2标准稀释水的制备：氯化钙溶液、硫酸镁溶液、碳酸氢钠溶液及氯化钾溶液分别移取25mL加 以混合，并用水稀释至1L，混匀后曝气，同时用溶氧仪测定，直至溶解氧浓度达到空气饱和值后，再用 氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节溶液pH值为7.0士0.2。 4.2.4.3样品稀释：根据试验需求，用标准稀释水（A.2.4.2）稀释样品配成不同浓度的试验溶液进行毒 生检测试验。 A.2.4.4稀释后样品温度调节：根据受试生物的不同，维持待测样品温度在合适范围。 A.2.4.5稀释后样品溶解氧调节：使用曝气泵曝气，维持待测样品溶解氧不低于空气饱和值的60%。

A.3哺乳动物毒性检测试验前处理

本步骤处理后的样品适用于多种哺乳动物毒性检测试验，包括：小鼠、天鼠、兔子等哺乳动物的急性 毒性、慢性毒性等毒性检测试验，为减少样品中悬浮颗粒对哺乳动物毒性检测结果的干扰，样品需过滤 处理后再进行pH调节及稀释

A.3.2.1盐酸溶液：0.1mo1/L。

过滤装置：带有真空泵的砂芯过滤装置，

A.3.4.1样品过滤：采用玻璃纤维膜对待测样品进行过滤。 A.3.4.2样品pH调节：用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节样品pH值为7.0士0.2。 A.3.4.3样品稀释：根据试验需求，用水稀释样品配成不同浓度的试验溶液进行毒性检测试验

3.4.1样品过滤：采用玻璃纤维膜对待测样品进行过滤。 3.4.2样品pH调节：用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节样品pH值为7.0士0.2。 3.4.3样品稀释：根据试验需求，用水稀释样品配成不同浓度的试验溶液进行毒性检测试验

药品标准A.3.4.1样品过滤：采用玻璃纤维膜对待测样品进行过滤。

A.4细胞毒性检测试验前处理

本步骤包括固相萃取和液液萃取两种方法， 用于多种细胞及多种毒性指标检测试验，细胞包括：各种人体细胞系、小鼠细胞系、大鼠细胞系等；毒性 指标包括：细胞增殖抑制率、遗传毒性、氧化应激效应、细胞酶活、内分泌干扰效应、致突变性等。为防止 详品中悬浮颗粒堵塞固相萃取柱，影响萃取效率，在固相萃取前需对样品进行过滤

A.4.3.1 过滤装置：带有真空泵的砂芯过滤装置。 A.4.3.2 固相萃取仪。 A.4.3.3 分液漏斗：2L。 A.4.3.4 氮吹仪。 A.4.3.5 旋转蒸发仪：配有带刻度的尖底浓缩瓶。

A.4.5.1PH调节：采用硫酸溶液调节样品至PH值小于0.5。 A.4.5.2浓缩：取1L样品，置于分液漏斗中，加入100g硫酸钠混匀，再加入100mL甲基叔丁基醚，上 下摇晃15min后，静置待溶液分层。取有机相置于带刻度的尖底浓缩瓶，放入旋转蒸发仪中，于 10℃旋转蒸发浓缩至2mL左右，取出将浓缩液转移至15mL试管，用10mL甲基叔丁基醚冲洗尖底 农缩瓶，冲洗液一并倒人15mL试管，采用氮吹仪氮吹至近干，最后用1mL二甲基亚砜溶解定容，得到 依缩1000倍的样品。浓缩后的样品在4℃下避光保存。 A.4.5.31C样品稀释：根据试验需求，用二甲基亚砜稀释浓缩后的样品配成不同浓缩倍数的试验溶液进 行细胞毒性检测试验

A.4.5.1pH调节：采用硫酸溶液调节样品至pH值小于0.5。 A.4.5.2浓缩：取1L样品，置于分液漏斗中，加入100g硫酸钠混匀，再加入100mL甲基叔丁基醚，上 下摇晃15min后，静置待溶液分层。取有机相置于带刻度的尖底浓缩瓶，放入旋转蒸发仪中，于 10℃旋转蒸发浓缩至2mL左右给排水造价、定额、预算，取出将浓缩液转移至15mL试管，用10mL甲基叔丁基醚冲洗尖底 农缩瓶，冲洗液一并倒人15mL试管，采用氮吹仪氮吹至近干，最后用1mL二甲基亚砜溶解定容，得到 依缩1000倍的样品。浓缩后的样品在4℃下避光保存。 A.4.5.3C样品稀释：根据试验需求，用二甲基亚稀释浓缩后的样品配成不同浓缩倍数的试验溶液进 行细胞毒性检测试验

GB/T39304—2020

1］GB/T19923一2005城市污水再生利用工业用水水质