DB32T 4366-2022 人载脂蛋白AⅠ羊多抗血清制备技术规程.pdf

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    江苏省市场监督管理局发布

    蛋白AI羊多抗血清制备技术规

    本文件运用于人载脂蛋白AI羊多抗血清制备中羊品种选择和饲养要求、免疫佐剂 选用、抗原乳化、抗原接种、抗体效价评估、抗血清制备的步骤和方法。

    太文件无规范性引用文件。

    下列术语和定义适用于本文件。 载脂蛋白AIApolipoproteinAI 用于运输血液中脂类的高密度主要载脂蛋白,A1是载脂蛋白A族中最多的一种组分: 约占HDL颗粒的65%,主要在肝脏、部分在小肠合成

    选用体重30kg一40kg生长发育良好、10月龄左右的健康羊。采用群养放牧,适当 式,每天早晚观察羊的健康状况

    采用高速剪切法乳化抗原。乳化容器需放置在降温夹套中,将佐剂按需要量置于乳化 容器中,用吸管以60滴/min的速度缓慢加入载脂蛋白AI抗原溶液,用漩涡混合器以1.5万

    rmp/min混合均匀,抗原溶液全部加完后,再持续混合15min

    每只羊免疫抗原剂量为1mg,抗原浓度为1mg/ml,为各部位平均接种。不同免疫次数 间的间隔天数和部位,见表1。

    在第7次免疫后动脉采血检测抗体水平建筑常用表格,采用琼脂扩散法进行效价测定,效价不低 可以判定为合格,可以采血。

    在检测抗体水平达到效价要求后,采用动脉一次性采血。血液用250mL玻璃瓶收集 血液占玻璃瓶的1/5

    把收集好血液的玻璃瓶,放在37°C恒温水浴锅中1h后,把玻璃瓶从水浴锅中取出; 再把血清从玻璃瓶中吸出;用低速离心机4500rmp/min,离心15min,取上清液,颜色为 乳白色或微黄色,去掉沉淀物杂质

    黄色或微红色血清状液体,允许少量的絮状

    全过程、血清保存和使用情况记录、归档。

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