地方标准

5.4.1外引牛引入前在输出地检测一次，引入后隔离45d～60d，混群前再检测一次。 5.4.2流产牛对流产母牛进行血清学检测，对流产物进行病原学检测。 5.4.3感染牛群每隔2～4个月普检一次，连续三次检测均为阴性视为假定净化牛群。 5.4.4假定净化牛群每隔4～6个月普检一次，连续两次检测均为阴性，视为净化牛群。检出感 染阳性牛时按5.4.3执行 5.4.5净化生群每隔3~6个月抽检一次，参照5.1热行，检出感染阳性生时按5.4.3热行

4.1外引牛引入前在输出地检测一次，引入后隔离45d～60d，混群前再检测一次。 4.2流产牛对流产母牛进行血清学检测，对流产物进行病原学检测。 4.3感染牛群每隔2～4个月普检一次，连续三次检测均为阴性视为假定净化牛群。 4.4假定净化牛群每隔4～6个月普检一次，连续两次检测均为阴性，视为净化牛群。检出 阳性牛时按5.4.3执行。 4.5净化牛群每隔3～6个月抽检一次，参照5.1执行，检出感染阳性牛时按5.4.3执行

5.4.1外引牛引入前在输出地检测一次电力标准规范范本，引入后隔离45d～60d，混群前再检测一次。

连续2年以上无布鲁氏菌病临床病例，布鲁氏菌抗体检测阴性；具备维持净化状态的生物安全 理条件。

7.1.1国内引进种用牛、乳用牛、精液、胚胎，应来源于取得《种畜禽生产经营许可证》的单位

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奶牛佩戴耳标、建立档案符合《畜禽标识与养殖档案管理办法》要求，保证可追溯到奶牛个体。 .3人员管理

3.1本场职工无布鲁氏菌病等人畜共患病，定期体检并取得健康证明。 3.2不得将生鲜的牛羊肉、乳等风险产品带入场区， 3.3从事接触奶牛、污染物等感染材料的工作时，做好个人防护

患病牛和感染阳性牛按《布鲁氏菌病防治技术规范》扑杀。被扑杀牛、病死牛、流产物、污染 按《病死及病害动物无害化处理技术规范》处理

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附录A （规范性） 布鲁氏菌抗体琼脂凝胶免疫扩散试验

光滑型布鲁氏菌经三氯乙酸提取获得2种抗原，一种是脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS），另 种是称为天然半抗原（NativeHapten，NH）的多聚糖。LPS抗原免疫原性强，自然菌和疫苗菌均 可刺激机体产生LPS抗体。NH抗原免疫原性弱，自然菌感染尤其在活动期或排菌期持续强烈刺激机体 产生NH抗体，而疫苗菌很难产生NH抗体。抗原与血清抗体均可在琼脂凝胶上扩散，结合形成复合物 寸在琼脂界面出现可见沉淀线。LPS抗原分子量大、扩散慢，沉淀线则靠近抗原端，NH抗原分子量小、 扩散快，沉淀线则靠近被检血清端。据此可以鉴别自然感染抗体和疫苗免疫抗体。

市政工程施工组织设计A. 2. 1 仪器与耗材

布鲁氏菌病抗体琼脂凝胶免疫扩散试剂盒，包含琼脂平板、LPS和NH混合抗原、阳性对照血清 性对照血清。

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A.4.1当“十”孔与“Ag”孔之间出现两条明显致密的沉淀线（靠近“Ag”孔的沉淀线为LPS抗原抗 体复合物，靠近“十”孔的沉淀线为NH抗原抗体复合物），而“”孔与“Ag”孔之间无沉淀线时（图 2所示）试验成立，否则应重新进行试验，

图2阳性对照和阴性对照结果示意图

A.4.2当被检血清孔与“Ag”孔之间出现两条明显致密的沉淀线（如图3中的“2”孔）时，判定该 孔血清为布鲁氏菌自然感染抗体阳性；当被检血清孔与“Ag”孔之间仅在靠近“Ag”孔出现一条明 显致密的沉淀线（如图3中的“4”孔）时，判定该孔血清为布鲁氏菌疫苗免疫抗体阳性；当被检血清 孔与“Ag”孔之间未出现沉淀线时（如图3中的“1”、“3”孔）玻璃标准规范范本，判定该孔血清为布鲁氏菌病抗体阴 生。

图3不同被检血清结果示意图